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發(fā)布時間:2026-05-13
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2026年4月至5月,一艘名為“洪迪厄斯”號(MV Hondius)的極地探險郵輪在大西洋航行期間,暴發(fā)了一場引發(fā)全球關注的漢坦病毒聚集性疫情。截至5月7日,世界衛(wèi)生組織共報告8例病例,其中3例死亡,病死率高達37.5%。經(jīng)南非國家傳染病研究所和瑞士日內(nèi)瓦大學醫(yī)院確認,此次疫情的病原體為安第斯型漢坦病毒——這是目前已知唯一能夠發(fā)生有限人際傳播的漢坦病毒型別.
當此類高致死率、可在密閉空間有限傳播的病毒疫情發(fā)生時,高通量測序(NGS) 是快速鑒定病毒亞型、追蹤變異和溯源傳播鏈條的核心技術。
高通量測序(NGS)檢測步驟
NGS 基本流程可簡化為 4 個核心步驟
核酸提取與檢測:利用DNA和RNA在低鹽溶液中的溶解度差異,先沉淀分離DNA核蛋白,再去除蛋白雜質(zhì),即可獲得純化DNA。
文庫建構(gòu)與文庫檢測:DNA片段加接頭修飾的過程,包含末端修飾、添加接頭、PCR擴增、質(zhì)量檢測等,完成建庫。
上機測序:以Illumina測序平臺為例,當單鏈化的文庫片段進入測序平臺的流通池之后,可以與流通池表面的寡核苷酸結(jié)合,從而進入測序過程。
數(shù)據(jù)分析:對原始數(shù)據(jù)進行過濾、比對參考基因組、變異檢測等處理,最終解讀出生物意義(如基因突變、基因表達量等)
如和確保建庫的順利完成?
通常在利用雜交捕獲方法進行目的片段富集的測序中,需要在建庫完成后對樣品進行混合和濃縮。樣品為DNA 片段,大小200-400bp,濃縮過程要求將500-2000 ng DNA 文庫(20-100 uL)濃縮至無液體殘留,樣品之間無交叉污染,同時要求樣品損失率低10%。
真空離心濃縮儀濃縮方案
利用真空離心濃縮儀可以在低溫(避免DNA斷裂)和真空環(huán)境下,溫和地去除樣本中的水分和有機溶劑的優(yōu)勢,最終滿足上機要求。
濃縮時間和損失率測試
對不同體積樣品的濃縮時間和損失率進行測試,結(jié)果顯示平均損失率約為5%。在過度干燥實驗中,回收率基本未受影響

表1 使用吉艾姆真空離心濃縮儀干燥時間及回收率測試結(jié)果
交叉污染測試
取DNA 樣品1(260bp,420bp,650bp 混合物)和DNA 樣品2(750 bp)各4份進行以下操作:
(1)通過毛細電泳確認樣品中DNA 片段大小和分布情況;
(2)樣品1 和2 同時進行濃縮,擺放位置分別選取相鄰和相對的空位;
(3)完全干燥后,加入50uL 水溶解,并重新進行毛細電泳檢測條帶
分布情況。

表2 使用吉艾姆真空離心濃縮儀交叉污染測試結(jié)果
結(jié)果表明,真空離心濃縮儀憑借較高的向心力,可有效抑制樣品底部沸騰,避免交叉污染。
吉艾姆Auto R3一體式濃縮儀技術優(yōu)勢:
專為NGS 測序而設計,內(nèi)置水、乙醇溶液專用程序,濃縮速度提升20%
一體式,內(nèi)置進口品牌隔膜泵
一次最高可濃縮180支1.5ml EP管,且無交叉感染。
兩段溫度控制設計,優(yōu)化濃縮方案
離心腔特氟龍涂層處理,整機防腐耐用
操作簡單,一鍵運行

北京吉艾姆儀器有限公司作為中國離心濃縮技術領域的領先者,十年來始終專注真空離心濃縮儀的研發(fā)與制造,是該領域國內(nèi)唯一的全產(chǎn)業(yè)鏈解決方案提供商。我們的產(chǎn)品廣泛應用于生命科學、藥物研發(fā)、化學合成與分析檢測等高端領域,為敏感樣品提供專業(yè)級保護。
如需詳細技術資料或定制方案,歡迎致電咨詢: 400-8030-186
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